凱氏定氮儀如何測定蛋白質(zhì)

    凱氏定氮儀可以檢測和分析食品中蛋白質(zhì)和氮的含量，在食品質(zhì)檢部門發(fā)揮著重要的作用。下面為大家簡單介紹一下該儀器是如何進行蛋白質(zhì)檢測的。

     蛋白質(zhì)是鑒定飼料質(zhì)量時必測的常規(guī)營養(yǎng)指標(biāo)。而大部分的飼料廠中的飼料蛋白質(zhì)的測定一般是使用凱式定氮儀來進行測定的，使用這種方法來進行測定能夠保證測定的準確度，但是測定的時候會花費一定的時間，那么在使用凱氏定氮儀的時候是如何進行測量的，本文就來進行簡單的介紹一下：

　　1  樣品處理：精密稱取 0.2～2.0g 固體樣品或 2～5g  半固體樣品或吸取 10～20mL液體樣品（約相當(dāng)?shù)?/span> 30～40mg），移入干燥的 100mL 或 500mL 定氮瓶中，加入 0.2g 硫酸銅，3g 硫酸鉀及20mL硫酸，稍搖勻后于瓶口放一小漏斗，將瓶以45°角斜支于有小孔的石棉網(wǎng)上。小心加熱，待內(nèi)容物全部炭化，泡沫*停止后，加強火力，并保持質(zhì)瓶內(nèi)液體微沸，至液體呈藍綠色澄清透明后，再繼續(xù)加熱 0.5h。取下放冷，小心加 20mL 水。放冷后，移入 100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸按同一方法做試劑空白試驗。

　　2  按圖裝好定氮裝置，于水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)裝水至約2/3處，加甲基紅指示液數(shù)滴及數(shù)毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數(shù)粒玻璃珠以防暴沸， 用調(diào)壓器控制，加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)的水。

3  向接收瓶內(nèi)加入 10mL2% 硼酸溶液及混合指示液1滴， 并冷凝管的下端插入液面下，吸取 10.0mL樣品消化稀釋液由小玻杯流入反應(yīng)室，并以 10mL  水洗滌小燒杯使流入反應(yīng)室內(nèi)，塞緊小玻杯的棒狀玻塞。將 10mL40%氫氧化鈉溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其緩緩流入反應(yīng)室，立即將玻塞蓋緊，并加水于小玻杯以防漏氣。夾緊螺旋夾，開始蒸餾。蒸氣通入反應(yīng)室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內(nèi)，蒸餾 5min。移動接受瓶，使冷凝管下端離開液面，再蒸餾1min。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以 0.05N 硫酸或 0.05N 鹽酸標(biāo)準溶液滴定至灰色或藍紫色為終點。

 凱氏定氮儀對蛋白質(zhì)的測定可以根據(jù)上述的方法進行檢測，為用戶獲取食物質(zhì)量的詳情的提供重要的數(shù)據(jù)信息。

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